TGR – Thermal Gradient Ring (Zimmermannova metoda)
Vlastnosti
- Nový kruhový design, vnitřní průměr 45 cm, vnější průměr 57 cm
- Tepelně izolovaná hliníková dráha ve tvaru prstence
- Ohřívač a chladič jsou na protilehlých stranách, takže je gradient symetrický
- 12 zón na každé straně (zrcadlově), každá 40cm2
- 4 vestavěné termočlánky v kruhu gradientu
- CCD-kamera (součástí standardního balení, s příslušnou podporou) a videotrackingový software ANYmaze
- Systém obsahuje set 4 duálních (viditelných/I.R.) světel
Výhody
- Duplicitní hodnoty, žádné okrajové efekty, žádné podněty v prostoru
- Citlivější než dosavadní metody: reprodukovatelná data bez zkreslení
- Nastavení gradientu je lepší než volba mezi dvěma deskami
- Teplotní Δ rovnoměrně dělena dvanácti (v popisu metody 15 °C–40 °C = 2.27 °C na zónu)
- Přesný gradient teplot je měřen v reálném čase
- Chování je automaticky nahráváno po dobu 60 minut
- Ideální pro videotracking: je dobře vidět i ve tmě
Použití
„Současné behaviorální testy na kvantifikaci normální citlivosti na zimu, hypersenzitivitu na zimu a studenou hyperalgezii u myší často přinášely protichůdné výsledky. Některé zachycovaly jen omezené spektrum teplot, některé byly náchylné k zaujatosti výzkumníků nebo nebyly dostatečně citlivé na to, aby mohly zachytit přínos iontových kanálků k vnímání chladu, protože u myší se malé změny v nocicepci chladu neprojevují jako znatelné změny chování. Abychom překročili dosavadní omezení, navrhli jsme nové zařízení, jež je automatizované, poskytuje vysoký stupeň svobody, tzn. výběr teplot, a eliminuje zaujatost vědce. Zařízení představuje test termálního gradientu navržený jako kruhovou dráhu na běhání. To umožňuje oddělení průzkumného chování od chování související s teplotním výběrem a poskytuje větší přesnost tak, že poskytuje duplikáty naměřených hodnot a odstraňuje okrajové artefakty. Naše na míru navržená automatická offline analýza pomocí algoritmu blob detection, redukuje pohybové artefakty a artefakty odrazu světla a poskytuje námi validovaný parametr kontroly kvality. Test poskytuje oddělené informace v množství oblastí plynoucích ze setrvávání v tepelně definovaných zónách, jako např. preferovanou teplotu a odchylku distribuce. Ukazujeme, že test umožňuje přesnější fenotypizaci tepelné citlivosti u transgenních myší tím, že odhaluje dosud neznámé detaily u fenotypů TRPM8-, TRPA1- a TRPM8/A1-deficitních myší.“
Z "Comprehensive thermal preference phenotyping in mice using a novel automated circular gradient assay". (Komplexní fenotypizace myší na základě teplotních preferencí za použití nového automatizovaného testu s kruhovým gradientem.)
-
Z. Winter, P. Gruschwitz, S. Eger, F. Touska and Katharina Zimmermann: "Cold Temperature Encoding by Cutaneous TRPA1 and TRPM8-Carrying Fibers in the Mouse" Front. Mol. Neurosci., 30 June 2017 , https://doi.org/10.3389/fnmol.2017.00209
Method paper
-
F. Touska Z. Winter, A. Mueller, V. Vlachova, J. Larsen and Katharina Zimmermann: "Comprehensive thermal preference phenotyping in mice using a novel automated circular gradient assay" Journal Temperature, Volume 3, 2016 - Issue 1